【MDS Express】多肽藥物色譜分析全流程解決方案

更新時間：2025-08-07

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多肽作為由多個氨基酸通過肽鍵連接而形成的一類化合物，通常由10~100個氨基酸分子組成，具有高活性、低劑量、低毒性等特點，相對于小分子化藥，具有更高的活性和更強的選擇性。目前，作為多肽主流合成方法的化學固相合成法，具有研發周期短、可快速生產、純度高的特點，尤其適合中短肽的合成。

多肽藥物的分子量大小介于小分子化藥和蛋白質藥物之間，然而化學合成多肽藥物在制備方法、結構確證和質量研究等方面均存在自身特性，無法簡單將其歸屬于小分子化藥或生物制品，由此在質量研究方面帶來諸多挑戰性。艾杰爾飛諾美專注于色譜分析領域解決方案，圍繞化學合成多肽藥物質量研究提供如下解決方案：

保護氨基酸手性分析

多肽有關物質固定相篩選組合

聚集體雜質SEC分析

氨基酸比值分析

有機酸殘留分析

保護氨基酸手性分析

涂覆型和鍵合型多糖手性固定相，提供廣泛對映選擇性！

Lux 涂敷型和鍵合型手性色譜柱能夠在效果上等同于其他多糖骨架和相似手性選擇劑的色譜柱，同時大幅節省成本。在無法實現分離或需要提升分離度時，Lux 固定相還能為其他手性選擇劑提供補充選擇性。

色譜條件:

色譜柱:

• Lux 5 μm Cellulose-1 250 x 4.6 mm OOG-4458-EO

• Lux 5 μm Cellulose-2 250 x 4.6 mm OOG-4456-EO

• Lux 5 μm Cellulose-3 250 x 4.6 mm OOG-4492-EO

• Lux 5 μm Cellulose-4 250 x 4.6 mm OOG-4490-EO

流速: 1 mL/min

柱溫: 室溫

波長: 220 nm

進樣體積: 5 μL

樣品濃度: 2 mg/mL (Fmoc保護氨基酸標品溶于甲醇或乙腈, L:D=2:1)

表1. 19種常見Fmoc保護氨基酸手性分析匯總

^a藍色高亮部分為D型保留時間

圖1. FMOC-Asp(OtBu)-OH and FMOC-Tyr(tBu)-OH反相手性分析色譜圖

多肽有關物質固定相篩選組合

色譜柱的特點

聚集體雜質SEC分析

Yarra 3μm高分離度尺寸排阻以顆粒為超純硅膠，最小粒徑為3μm超純硅膠為基礎，Yarra顆粒表面高密度鍵合了專有的親水固定相配體。由于確保了一致的粒徑和孔徑分布，以及嚴格的填裝和質檢規格，Yarra 色譜柱可實現非常高的柱效和分離度。

氨基酸比值分析

Durashell AA 氨基酸分析方法試劑包是基于目前廣泛使用的以OPA(鄰苯二甲醛)和FMOC(氯甲酸-9-芴基甲酯)為衍生劑的柱前衍生HPLC氨基酸分析方法。該方法具有簡便、快速、準確、無需要手動衍生，可全自動化在線分析等優點。是目前氨基酸分析中具有吸引力的分析方法之一。

圖 1. OPA 在巰基試劑存在下與一級氨基酸的衍生反應圖

圖2. FMOC 與二級氨基酸的衍生反應圖

液相色譜分析：

色譜柱：Durashell AA, 4.6*150 mm; 3 μm; 100 ?

柱溫：45 ℃

波長：

• 一級氨基酸: 338 nm, 帶寬 10 nm; 參比波長: 390 nm, 帶寬 20 nm

• 二級氨基酸: 262 nm, 帶寬 16 nm, 參比波長: 324 nm, 帶寬 8 nm

狹縫：4 nm, 峰寬＞0.03 min

梯度洗脫程序：

混合氨基酸對照溶水解液相色譜圖(一級氨基酸)

混合氨基酸對照溶液水解液相色譜圖(二級氨基酸)

混合氨基酸對照溶液保留時間

利那洛肽樣品溶液150℃下水解測試數據

有機酸殘留分析

色譜條件:

色譜柱：Venusil MP C18；5 μm；4.6×250 mm，

流動相：A: 0.1%磷酸水 B: 乙腈；

流速：0.8 mL/min；

柱溫：30 ℃；

進樣量：1 μL；

波長：210 nm；