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固相萃取(SPE)技術憑借出色的樣品前處理效率,在環境監測、食品檢測、生物醫藥等領域一直有著廣泛的應用。不過在實際操作實驗時,我們常會遇到 SPE 回收率偏低,結果不盡如人意的情況,這不僅可能影響檢測結果的準確性與可靠性,還可能讓辛苦獲得的實驗數據效果打折扣,甚至在一定程度上延緩研究進度。所以,梳理出一套關于SPE 回收率低的排查思路,希望對提升實驗效率、保障數據質量能起到積極的幫助作用。
在前處理SPE實驗中,從樣品上樣到洗脫收集,固相萃取的每一步都需要按照操作規程執行,確保每一步都正確無誤。接下來,讓我們深入實驗細節,對回收率低進行分步排查和思考,為實驗成功掃清障礙。
目標物回收率低,可能的原因主要分為以下幾個情況:未保留?被淋洗?未被洗脫或部分洗脫?
這時候我們可能需要“追蹤"目標分析物的去向。
具體的操作步驟
配制一份不含樣品基質的目標分析物溶液(即溶劑標作為理想樣品),將上樣液、淋洗液、洗脫液分步收集,分別進樣分析,目的是確定造成目標物損失的步驟。
如在1中檢測到目標物
如在2組分中檢測到目標分析物
如1,2步均未檢測到目標分析物,則說明目標分析物一定保留在了固相萃取柱上,此時可嘗試以下措施:
- 使用強度更高的洗脫溶劑。
- 確保洗脫溶劑的pH值正確。
- 若前兩項建議無效,可嘗試使用保留能力更弱的吸附劑(例如在反相萃取中,若目標分析物疏水性強,可將C18固相萃取柱換成C8固相萃取柱)。
總的來說,排查固相萃取(SPE)回收率偏低的問題,需聚焦樣品特性、操作流程、耗材性能等不同維度拆解分析。遵循 “逐一驗證、排除干擾" 的邏輯精準定位癥結,這套排查思路不僅助力于破解回收率異常,更可反向賦能SPE 操作流程的標準化建設與實驗方案的優化升級(如樣品前處理方法的迭代、適配耗材的篩選)。隨著 SPE 技術的持續演進,若能不斷完善排查邏輯,并融合智能化工具(如自動檢漏系統、實時流速監控模塊)提升排查效能,必將進一步拓展其在環境監測、食品檢測、醫藥研發等領域的精準應用價值。